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大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞

產(chǎn)品簡介

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。

產(chǎn)品型號:復蘇/凍存
更新時間:2025-07-01
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:662
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大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞

產(chǎn)品名稱 :大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1264h

組織來源 :腦組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。少突膠質(zhì)細胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),在銀浸染標本中,少突膠質(zhì)細胞比星狀膠質(zhì)細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質(zhì)細胞或寡突膠質(zhì)細胞。少突膠質(zhì)細胞(oligodendrocyte)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(C N S)的成髓鞘神經(jīng)膠質(zhì)細胞,其發(fā)育要經(jīng)歷少突膠質(zhì)細胞祖細胞、前少突膠質(zhì)細胞祖細胞、未成熟和成熟少突膠質(zhì)細胞等階段。有學者將少突膠質(zhì)細胞按其發(fā)育程度和形態(tài)分為三型。但是,細胞發(fā)育是一個連續(xù)的過程,其形態(tài)、表達產(chǎn)物和功能的演變沒有嚴格的界限,因此,其分類是相對的。

這三型分別為:Ⅰ型少突膠質(zhì)細胞又稱前O 2A (pre-O 2A p ro genitorcell)。細胞呈圓形,表面光滑,直徑約3μm,體外混合培養(yǎng)時成簇生長在星形膠質(zhì)表面,具有很強的分裂增殖潛力,表達神經(jīng)節(jié)/苷脂GM 1、波形蛋白和多唾液酸—神經(jīng)粘附分子(polysialic acid -neuralcellad h esionmolecule,P SA-NCAM )等。Ⅱ型少突膠質(zhì)細胞胞體常有雙極或三極突起,極少數(shù)為單極突起,直徑約7μm ,有一定的分裂增殖能力。體外培養(yǎng)時為雙潛能細胞,既可分化為少突膠質(zhì)細胞又可分化為Ⅱ型星形膠質(zhì),故又稱為少突膠質(zhì)細胞-Ⅱ型星形膠質(zhì)祖細胞(oligo d en d ro cyte-typ e-2astro cyte p ro genitorcell,O 2A)。O 2A除表達G M 1和波形蛋白外還表達神經(jīng)節(jié)/苷脂G D 3和G Q(淋巴雜交瘤株A 2B5產(chǎn)生G Q 的抗體),故常用A 2B5抗體標記O 2A 。Ⅲ型少突膠質(zhì)細胞不再具有分裂增殖能力,為分裂終期細胞。直徑約10μm 。根據(jù)其形成髓鞘的能力,又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質(zhì)細胞。不成熟的O L胞體常伸出4~5條較粗大突起,表面還殘留有A 2B5標記物,同時也表達O 1-O 4抗原,無形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質(zhì)細胞突起有如蜘蛛網(wǎng),大量表達半乳糖腦苷脂(galactocerebro side,G C )、蛋白脂蛋白(proteiolipidprotein,PLP)、髓鞘堿性蛋白(m yelin basic protein,M BP)等,有對軸突髓鞘化的能力。體外培養(yǎng)的少突膠質(zhì)細胞前體細胞(簡稱少突膠質(zhì)細胞前體細胞)包括前O 2A 和O 2A 和未成熟少突膠質(zhì)細胞,前兩者具有增殖能力。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 : PLL(0.1m g/ml)
培 養(yǎng)  基 : 含B-27、PD G F、bFG F、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁
細胞形態(tài) : 雙極、多極形
傳代特性 : 不傳代,不增殖,存活1-2周
傳代比例 : 不傳代
消 化  液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%


該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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