木質(zhì)素（Lignin）含量試劑盒說(shuō)明書(shū)

微量法 100管/96樣

注   意 ：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義：

木質(zhì)素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的成分之一，是由聚合的芳香醇構(gòu)成的一類(lèi)物質(zhì)，存在于木質(zhì)組織中，主要作用是通過(guò)形成交織網(wǎng)來(lái)硬化細(xì)胞壁。木質(zhì)素主要位于纖維素纖維之間，起抗壓作用。

測(cè)定原理：

木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙酰化后在280nm處有特征吸收峰，280nm的吸光值高低與木質(zhì)素含量正相關(guān)。

需自備的儀器和用品：

天平、40目篩，玻璃試管、燒杯、離心機(jī)，恒溫水浴鍋、封口膜、烘箱、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、高氯酸，濃硫酸。

試劑組成和配制：

試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：液體100mL×1瓶，4℃保存。

樣品處理：

樣品80℃烘干至恒重，粉碎，過(guò)40目篩，稱(chēng)取約2mg（記為W）于10mL玻璃試管中（務(wù)bi用玻璃試管，不可用Ep管）

測(cè)定操作表：

計(jì)算公式：

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0347x+0.0068，R²=0.9889

Lignin（mg/g干重）= (ΔA-0.0068)÷0.0347×V反總×10^-3÷W×T=0.0294×(ΔA-0.0068) ÷0.002×50

V反總：反應(yīng)總體積：1.02mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：稀釋倍數(shù)

注意事項(xiàng)：

1. 試劑一有毒性，請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施，加熱前必須用封口膜密封，以防氣體溢出。

2. 加熱過(guò)程中有劇烈反應(yīng)，震蕩時(shí)輕搖，以免壓力過(guò)大噴出造成人身傷害。

3. 試劑三具有強(qiáng)刺激性，建議操作過(guò)程全部在通風(fēng)櫥子操作。

4. 取上清加試劑三步驟根據(jù)自己樣品乙酰化程度，試劑三的用量可調(diào)整，保證吸光值在0.1-0.8之間即可，并在公式中參與計(jì)算。